1 前言

粗脂肪是飼料中的重要營養(yǎng)素，飼料中的粗脂肪含量是評價飼料質(zhì)量的標準之一。飼料脂肪的測定，通常是將試樣放在特定的儀器中，用脂溶性溶劑(乙醚、氯仿、石油醚等)反復浸提試樣、稱量提取物的重量，因在提取物中除脂肪外，還有有機酸、磷脂、脂溶性維生素、葉綠素等，所以提取物稱為粗脂肪或乙醚提取物。本文就目前應(yīng)用較多的幾種方法進行分析，比較其各自的優(yōu)缺點，以為讀者選擇恰當測定方法提供一點幫助。

基本原理：根據(jù)飼料中的油脂均可溶解于乙醚中，故用無水乙醚反復浸提飼料中的脂肪，使脂肪全部溶解于乙醚中，然后將乙醚蒸發(fā).瓶中所剩殘渣的重量即為飼料的粗脂肪含量。

2 油重法(或抽提瓶增重法)

2.1 原理

試樣在抽提管中反復抽提，直到脂肪抽提干凈，抽提瓶的增重即為樣品所含粗脂肪重量。

2.2 材料方法

索氏脂肪提取器、分析天平、電熱恒溫鼓風干燥箱、水浴鍋、乙醚等。

索氏提取器應(yīng)干燥無水：抽提瓶在105±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷卻30min，再烘干30min，同樣冷卻稱重。

稱取試樣l～5g(置于濾紙筒中或用濾紙包好.濾紙包應(yīng)低于提取器虹吸管的高度，并應(yīng)全部浸泡于乙醚中，將濾紙包放人抽提管，在抽提瓶中加無水乙醚，在60～75℃的水浴加熱，70次為抽提終點(或以抽提管流出的乙醚揮發(fā)后不留下油跡為抽提終點)。

取出試樣，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶內(nèi)的乙醚被全部收完.取下抽提瓶。在水浴鍋上蒸除殘留乙醚。擦凈外壁，將抽提瓶放人105±2℃烘箱中烘干120min，燥器中冷卻30min，稱重，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次質(zhì)量差小于0.001g為恒重，抽提瓶前后重量之差為粗脂肪含量。

2.3 優(yōu)點

2.3.1 樣品含有的粗脂肪，完全被抽提瓶回收，可以進一步分析樣品脂肪酸組成，及脂肪酸品。

2.3.2 整個過程在樣品絕干狀態(tài)下進行。實驗結(jié)果產(chǎn)生誤差的機會小。

2.4 缺點

2.4.1 長時間烘干，抽提瓶會在恒重之后又增重。主要原因是粗脂肪有可能在抽提瓶發(fā)生氧化反應(yīng)而使重量增加，粗脂肪品質(zhì)發(fā)生變化。

2.4.2 抽提瓶重量、體積均較大.在分析天平上稱量時有一定的困難。

2.4.3 實驗一次想進行多個樣品?；蜃龆嘟M重復時，需要的提取器相應(yīng)增多，不利于同時進行，在實驗性教學上不方便。

2.4.4 時間長，危險大，整個實驗完成大概要8h左右。乙醚有毒，易揮發(fā)，大量吸人頭暈、眼酸、腹瀉。有些情況下還可能燃燒。

3 殘余法(或濾紙包減重法)

3.1 原理

試樣在抽提管中反復抽提。直到脂肪抽提干凈，濾紙包的減重即為樣品所含粗脂肪重量。

3.2 材料方法

同上法前半部分取出試樣。仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶內(nèi)的乙醚被全部收完，將樣品包放人105±2℃烘箱中烘干120min。燥器中冷卻30min，稱重，再烘干30min，同樣冷卻稱重，兩次質(zhì)量差小于0.001g為恒重，濾紙包前后重量之差為樣品粗脂肪含量。

3.3 優(yōu)點

3.3.1 一個抽提管可以盛多個樣品包(只需在樣包上用鉛筆做出標記即可)，有利于同時進行多個樣品，或進行多組重復。適合教學實驗用。

3.3.2 濾紙包中的樣品經(jīng)過脫脂處理，可以進行其他相關(guān)養(yǎng)分的分析測定。省去再脫脂的步驟。

3.4 缺點

3.4.1 濾紙包在稱量過程中，由于是絕干狀態(tài)。很容易吸潮，在分析天平上很難平衡。對實驗結(jié)果造成影響。，

3.4.2 實驗不能進一步分析樣品中粗脂肪的品質(zhì)及組成.因為不能清楚粗脂肪來源于哪個樣包，哪種樣品。

3.4.3 同2.4.4。

4 濾袋技術(shù)測定粗脂肪

濾袋技術(shù)(Filter Bag Technology，F(xiàn)BT)用于批量分析飼料中的纖維含量的推廣。使ANKOM Technology在1993年準確測定酸性洗滌纖維(Acid Detergent Fiber，ADF)，中性洗滌

纖維(Neutral Detergent Fiber，XDF)和粗纖維(Crude.Fiber;CF)。基于在纖維分析方面已獲得的經(jīng)驗，ANKOM Technology新近又開發(fā)了一項快速批抽提脂肪技術(shù)(Accelerated Batch Extraction，ABE)、ANKOM xT20脂肪分析儀是采用ANKOM技術(shù)開發(fā)的一項使用普通溶劑快速抽提食品和飼料脂肪的新技術(shù)而研制成的。

4.1 原理

ABE的原理十分簡單。樣品被分裝在一種用特殊材料制作的濾袋中，在溶劑的作用下，脂肪溶解透出濾袋。而樣品基質(zhì)顆粒不能通過濾袋而留在濾袋中.從而實現(xiàn)脂肪與樣品基質(zhì)的分離。

4.2 材料方法

脂肪分析儀、濾袋、石油醚、封口機稱取1～39代表性樣品于已知重量的XT20濾袋中，封口。將盛有樣品的濾袋擺放在樣品架上。將樣品架放入分析儀的抽提缸中。按UD按扭關(guān)閉抽提缸蓋。從操作控制臺(OperatorControlStation，OCS)上選擇程序方式。按“Auto Star”自動開始。一旦一個程序或者手動輸入設(shè)定被選中。儀器會開始所有的所需步驟。當抽提過程完成后。將顯示“Test Complete—Remove Sample”(測試結(jié)束，移去樣品)。將濾袋置于100℃條件下干燥lh，并稱重。濾袋前后重量之差即為樣品粗脂肪含量。

4.3 優(yōu)點

4.3.1 高效。一次能用不同的方式完成20個樣品的抽提，多數(shù)情況下，30～50min內(nèi)完成抽提，適合要求準確、精密和快速的測定粗脂肪的實驗室采用。

4.3.2 安全，使石油醚代替乙醚，沸點升高，每個操作環(huán)節(jié)都有安全保證裝置，不易發(fā)生爆炸、燃燒。

4.4 缺點

該套儀器設(shè)備，目前價格昂貴，國內(nèi)只有少數(shù)科研院所有，不易在大規(guī)模的飼料分析實驗中采用。

5 脂肪測定儀測

5.1 原理

仍然是經(jīng)典的索氏提取法.但又將浸提過程分為高溫沸騰浸提和沖洗兩個步驟。浸提時間大為縮短。

5.2 材料方法

脂肪測定儀(配濾紙簡)，分析天平，烘箱，無水乙醚。根據(jù)樣品的脂肪含量，準確稱取過40目篩的樣品2～5g，放人濾紙筒內(nèi)，烘干樣品，把濾紙筒放到脂肪測定儀中。樣品提取杯中加人50mL無水乙醚，放到儀器的加熱板上。壓下連接手柄，使提取杯與回流器密封連接。接通冷凝水。將濾紙筒通過滑桿放人提取杯中，打開電源，5min內(nèi)乙醚沸騰，樣品進行高溫浸提，提取lh后，拉動滑桿，將濾紙筒從提取杯中提升出來。用回流冷凝的乙醚淋洗樣品殘余的脂肪30min，關(guān)閉淋洗閥門，開始回收乙醚，約5min乙醚回收完畢，取下提取杯，在105℃烘干至恒重，提取杯增重即為粗脂肪的含量。

5.3 優(yōu)點

5.3.1 脂肪測定儀測定的不同樣品所取得的結(jié)果來看，其精密度、準確度都很好，說明用脂肪測定儀測定的結(jié)果準確可靠。

5.3.2 用脂肪測定儀測定的速度快。當天可完成整個測定過程，取得測定結(jié)果，并且可同時測定6個試樣。與經(jīng)典方法比較大大提高了效率、簡化了操作、降低了成本、節(jié)省了能源，能較好地滿足日常生產(chǎn)和商貿(mào)交易工作中對脂肪含量測定的需要。